技術(shù)文章
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高通量蛋白質(zhì)穩(wěn)定性分析可用于評(píng)估大量蛋白質(zhì)在不同條件下的穩(wěn)定性,其目的在于篩選出穩(wěn)定性高、適合進(jìn)一步研究和應(yīng)用的蛋白質(zhì)候選物,廣泛應(yīng)用于藥物篩選、成藥性分析、生物技術(shù)藥物研發(fā)等領(lǐng)域。差示掃描熒光法(DSF):原理:通過檢測(cè)當(dāng)溫度升高或變性劑存在時(shí),蛋白質(zhì)內(nèi)源熒光的發(fā)射光譜變化來確定蛋白質(zhì)的變性轉(zhuǎn)變溫度(熱轉(zhuǎn)變溫度Tm值或化學(xué)變性Cm值)。特點(diǎn):無需對(duì)待測(cè)樣品進(jìn)行標(biāo)記或使用熒光探針,即可快速測(cè)量整塊...
圓二色光譜(簡(jiǎn)稱CD)是應(yīng)用廣泛的測(cè)定蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)的方法,是研究稀溶液中蛋白質(zhì)構(gòu)象的一種快速、簡(jiǎn)單、較準(zhǔn)確的方法。它可以在溶液狀態(tài)下測(cè)定,較接近其生理狀態(tài)。而且測(cè)定方法快速簡(jiǎn)便,對(duì)構(gòu)象變化靈敏,所以它是目前研究蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)的主要手段之一,并已廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)的構(gòu)象研究中。根據(jù)圓二色光譜法的原理和測(cè)試要求設(shè)計(jì)制成的儀器稱為圓二色光譜儀。圓二色光譜儀適用于手性無機(jī)和有機(jī)化合物的圓二色性分析,包括手性晶體、手性超分子體系和不含手性配體的手性配位聚合物,天然手性化合物,包括蛋白質(zhì)...
停流(stoppedflow)是一種光譜技術(shù),用于研究溶液體系的非常快速的反應(yīng)的機(jī)理,反應(yīng)的時(shí)間一般在0.001秒到0.01秒之間,這個(gè)瞬時(shí)動(dòng)力學(xué)現(xiàn)象可反映反應(yīng)的速度、機(jī)理、短時(shí)間存在過的反應(yīng)中間體等基礎(chǔ)信息。停流光譜儀用于研究溶液體系的非??焖俚姆磻?yīng)的機(jī)理,這個(gè)瞬時(shí)動(dòng)力學(xué)現(xiàn)象可反映反應(yīng)的速度、機(jī)理、短時(shí)間存在過的反應(yīng)中間體等基礎(chǔ)信息。在分子水平上解釋分子間相互作用的機(jī)理、過程和原因,反應(yīng)的驅(qū)動(dòng)性因素(驅(qū)動(dòng)力),在蛋白質(zhì)折疊動(dòng)力學(xué)、酶動(dòng)力學(xué)、底物結(jié)合、構(gòu)象轉(zhuǎn)變、快速化學(xué)反應(yīng)動(dòng)...
激光閃光光解是用來觀測(cè)分子受光激發(fā)后,由基態(tài)S0躍遷到激發(fā)態(tài)Sn過程中發(fā)生的一系列變化和反應(yīng)。它主要由激發(fā)光源、檢測(cè)光源、信號(hào)檢測(cè)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成,通過利用一定強(qiáng)度的激發(fā)光源入射到所研究的體系中,結(jié)合時(shí)間分辨吸收和發(fā)射瞬態(tài)光譜及相應(yīng)的動(dòng)力學(xué)衰減曲線等方法來研究反應(yīng)過程中激發(fā)單重態(tài)、激發(fā)三重態(tài)、自由基和正、負(fù)離子等瞬態(tài)反應(yīng)中間體的一種有效手段。主要用來測(cè)量液體、固體的瞬態(tài)吸收光譜的動(dòng)力學(xué)分析及時(shí)間分辨的吸收光譜,包括以下幾個(gè)方面:①光敏化反應(yīng)研究,探討激發(fā)態(tài)物種的能量轉(zhuǎn)移、電...
圓二色光譜(簡(jiǎn)稱CD)是應(yīng)用廣泛的測(cè)定蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)的方法,是研究稀溶液中蛋白質(zhì)構(gòu)象的一種快速、簡(jiǎn)單、較準(zhǔn)確的方法。它可以在溶液狀態(tài)下測(cè)定,較接近其生理狀態(tài)。而且測(cè)定方法快速簡(jiǎn)便,對(duì)構(gòu)象變化靈敏,所以它是目前研究蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)的主要手段之一,并已廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)的構(gòu)象研究中。圓二色光譜儀是研究分子結(jié)構(gòu)不對(duì)稱性的有效的分析儀器,可以實(shí)現(xiàn)以下測(cè)量功能:1.圓二色譜CD2.旋光色散譜ORD3.線二色譜LD4.熒光圓二色譜FDCD5.磁圓二色譜MCD等廣泛應(yīng)用于:1、光學(xué)活性化合物的...